（一）分离培养

取服用抗生素前的腹泻粪便或宫颈粘液等，3小时之内接种于具有高度选择性的平板培养（以布氏菌分离琼脂培养基为基础再加10%羊血，另外每升加入万古霉素10mg,多粘菌素B2500Iu，Amphoterin 13mg,Cephalocin 15mg），然后放玻璃缸内（内含85%N2，10%CO2，5%O2），置42℃孵箱内培养48小时，挑选可疑菌落，再用生化反应和血清凝集试验作出最后鉴定。

（二）血清学检查

发病一周后，血清内可出现抗体，主要为lgM，可用间接血凝试验及间接免疫荧光试验等检测特异性抗体效价，正常人或带菌者血清效价可达1：2～1：8，急性期病人抗体效价可达1：8～1：32，恢复期可达1：80～1：320以上。由于血清抗体效价不高，须采取双份血清检测，以效价增高4倍作为诊断依据。