胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3，需要降低胶体金的pH值时可用0.1n HCl。测定金溶液的pH可能损害pH测定计的探头，因此，一般用精密的pH试纸测定其pH即可。

几种常用的蛋白质标记时胶体金所用的pH值见表5-4。

表5-4 常用几种蛋白质标记时胶体金所用的pH值如下

蛋白质 pH
抗体（γ球蛋白） 9.0
亲合层析的IgG 7.6
单克隆抗体 8.2
F（ab＇）2 7.2
SPA(葡萄球菌蛋白) 6.0
蓖麻子植物凝血素Ⅰ 8.0
蓖麻子植物凝血素Ⅱ 8.0
花生凝集素 6.3
Helix pomatia lectin 7.4
大豆凝集素 6.1
Lens Culinaris lectin 6.9
Lotus Tetragonolobus lectin 6.3
荆豆凝集素 6.3
Bandeirae simplicifolia lectin 6.2
过氧化物酶 8.0
类卵粘蛋白 4.8
血浆铜兰蛋白 7.0
α-胎球蛋白 6.5
小牛血清白蛋白 6.5
牛血清白蛋白 5.5
牛血球白蛋白结合肽 4.5
牛血清白蛋白结合胰岛素 5.3
霍乱毒素 6.9
破伤风毒素 6.9
DNAase 6.0
RNAase 9.0
低密度脂蛋白 5.5
α2-巨球蛋白 6.0
抗生物素蛋白（亲合素） 10.0
链霉抗生物素蛋白 6.6
麦胚凝集素 9.9