（1）用4%多聚甲醛（在0.05mol/l 磷酸缓冲液中，pH7.2）在原位固定（4^℃）1h。

（2）用0.05mol/l PBS充分洗涤后，用HRP标记的抗体血清作用18h，再用PBS充分洗涤。

（3）2%戊二醛固定1h，再水洗。

（4）呈色反应，用DAB—H₂O₂呈色反应，水洗。

（5）1%锇酸后固定30min～1h，原位用环氧树脂包埋，光镜作半薄切片定位，作超薄切片。