1．原理

血清加入醇溶性氢氧化钾，使胆固醇从脂蛋白中分离出来，同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇，加石油醚振摇、抽提，使胆固醇移入石油醚层，分离并取一定量的石油醚层，蒸发至干，再进行Liebermann-Burchard 显色反应，620nm比色定量。该法可用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。

2．试剂组成

代号 种类 浓度 组　成 贮存2～8℃ 有效时间
R1 乙醇 优质纯
R2 石油醚 沸点68℃，特级纯
R3 水醋酸 分析纯
R4 无水醋酸 胆固醇分析用，不含HCI
R5 浓硫酸 分析纯
R6 KOH液 33%(W/W) KOH10g+H2O20ml
R7 乙醇性KOH液 R194ml+R66ml 临用前配制
R8 Liebermann 配制后
Burchard R420体积+R51体积+R310体积 1h
试剂* 内用完
R9 胆固醇标准液 5.17mmol/L 胆固醇标准品200mg+R1→100ml

*：在三角烧瓶内，加入无水醋酸，于冰水中冷至10℃以下，再慢慢加入浓硫酸，混合，静置10min，又加冰醋酸混匀，备用。

3．操作

血清胆固醇（Abell法）测定操作图

图15-1 血清胆固醇（Abell法）测定操作图

按图15-1操作。

4．计算

标准总胆固醇浓度=ESA/EST×5.17(mmol/L)