血清中甘油三酯经脂肪酶水解为甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，尔后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羟丙酮并生成H2O2，H2O2与底物4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色亚醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其颜色深浅与甘油三酯含量成正比。

二、酶法（GK-GPO-POD比色法） - 图1

（一）手工测定法

1．试剂组成

代号 种类 浓度 贮存2～8℃
R1 磷酸甘油氧化酶 ≥3.0KU/L 冷藏
（A液） 抗坏血酸氧化酶 ≥1.0KU/L
甘油激酶 ≥0.7KU/L
4-氨基安替比林 80mg/L
R2 脂蛋白脂酶 ≥2.0KU/L 冷藏
过氧化物酶 ≥10KU/L
ESPAS 300mg/L
R3（参考液） 甘油酸三脂 200mg/dl（2.26mmol/L） 冷藏

*：一般采用商品试剂盒

血清甘油三酯测定法（酶法）操作图

图15-4 血清甘油三酯测定法（酶法）操作图

2．操作

按图15-4操作。

3．计算

血清TG浓度=ESA/EST×2.26(mmol/L)

（二）生化分析仪检测

全自动生化分析仪测定操作（以CL-7200型为例）。

1．试剂

A液：GK，GPO，4-AA-P、抗坏血酸氧化酶等。

B液：POD，Lipase,ESPAS等。

标准液：甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。

2．上机参数

名称 参数
方法 终点法
波长 双波长（540nm 700nm）
试剂A反应时间 2～3min
试剂B反应时间 5～6min
反应温度 37℃
样本用量 4μl
试剂A用量 200μl
试剂B用量 100μl
单位 mmol/L

3．操作过程

生化分析仪检测操作过程

4．计算

以△A=A2-A1并根据同样之标准或质控物计算，自动打印结果。

5．注意事项

①试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。

②试剂在有效期内2～8℃避光保存。

③样本中甘油三酯含量超过11mmol/L需用生理盐水稀释后再测。