1.原理
血清中加入异丙醇抽提取甘油三酯,经KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸,甘油在过碘酸作用下氧化成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色的3,5二乙酰,1,4二氢甲基吡啶,其颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比,420nm测定定量。该法可用于基本功训练及组织细胞TG的提取测定。
2.试剂组成
代号 | 种类 | 浓度 | 组成 | 贮2-8℃ | 有效时间 |
R1 | 抽提液 | (CH3)CHOH(A.R)重蒸馏 | |||
R2 | 吸附剂 | 氧化铝,水洗除去微细颗粒, 110℃烤干3h以上 | 闭封 | 一周 | |
R3 | 皂化剂 | 5% | KOH 5g+H2O→100ml | ||
R4 | 醋酸溶液 | 2mol/L | CH3COOH 11.5ml+H2O→100ml | ||
R5 | 过碘酸钠 | 0.05mol/L | NaIO41.07g+H2O→100ml | ||
R6 | 氧化剂 | R4 1体积+R51体积 | 一周 | ||
R7 | 醋酸铵液 | CH3COONH215.4g+H2O→100ml | |||
R8 | 显色剂 | CH3COCH2COCH30.75ml+R-1 | |||
40ml+R-7 100ml+R-4 80ml | |||||
R9 | 参考液 | 2mg/dl | 三油酸甘油酯2mg+R-1→100ml(TG100mg/dl) |
3.操作
按图15-3操作。
图15-3 血清甘油三酯(乙酯丙酮法)测定操作图
4.计算
血清TG浓度=ESA/EST×1.13(mmol/L)