1.原理
血清中游离脂肪酸或非酯化脂肪酸(NEFA),经酶试剂作用生成紫色化合物,其颜色深浅与NEFA含量成正比。
2.试剂组成
代号 | 种类 | 组成 | 浓度贮存 | 贮存 |
R1 | 缓冲液 | 磷酸缓冲液 MgCl2液 去垢剂 |
0.04mmol/LpH6.9 3mol/L |
|
R2 | 酶/辅酶 | 乙酰CoA合成酶 抗坏血酸氧化酶 CoA ATP 4-AAP 溶于10ml R1液中 |
≥0.3U/ml ≥1.5U/ml 0.9mmol/L 5.0mmol/L 1.5mmol/L |
冷藏5日 |
R3 | 酶稀释液 | 苯氧乙醇 去垢剂 |
0.3%(V/V) | |
R4 | 马来酰亚胺 该试剂与R3等体积混合 |
10.6mmol/L | ||
R5 | 酶试剂 | 乙酰CoA氧化酶 过氧化物酶 TOOS 混合上述试剂,再等体积R4试剂混合 |
≥10U/ml 7.5U/ml 0.2mmol/L |
冷藏5日 |
R6 | 标准液 | 1mmol/L | 冷藏 |
*应用带玻塞离心管
3.操作
按图15-8操作。
4.计算
图15-7 血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图
图15-8 血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图
(胡汉宁 储建中)